|
豬流感病毒抗體檢測試劑盒本試劑盒由預(yù)包被豬流感病毒的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清或血漿樣本中豬流感病毒抗體。
收藏
商品說明
豬流感病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 使用說明書 產(chǎn)品名稱 通用名:豬流感病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 包裝規(guī)格 96T×1/盒 檢測原理 本試劑盒由預(yù)包被豬流感病毒的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清或血漿樣本中豬流感病毒抗體。實驗時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬流感病毒抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加TMB底物液,與酶標(biāo)結(jié)合物反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬流感病毒抗體。通過抗體水平來初步判斷,被檢對象是否感染豬流感病毒。 試劑盒組成
儲存及有效期 2~8℃保存,有效期12個月。 包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。 適用儀器 含450nm波長的酶標(biāo)儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。 樣品準(zhǔn)備 1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。 2.根據(jù)樣本數(shù)量準(zhǔn)備對應(yīng)數(shù)量的小刻度EP管或血清稀釋盤,用樣品稀釋液將待檢血清按50倍稀釋(如4μl血清加入196μl樣品稀釋液中,混勻)陰性、陽性對照不用稀釋。 3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水加1份濃縮洗滌液)。 檢驗方法 1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。 2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)陰性、陽性對照各1孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。 3.陰性、陽性對照孔分別加入陰性、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。 4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃溫箱孵育30分鐘。 5.甩去孔內(nèi)液體,每孔加250ul工作洗滌液,用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。 6.每孔加酶標(biāo)記物100μl,置37℃避光反應(yīng)30分鐘。 7.甩去孔內(nèi)液體,每孔加250ul工作洗滌液,用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。 8.根據(jù)樣本數(shù)量將顯色液A與顯色液B按等體積比例混勻配置為底物工作液,現(xiàn)配現(xiàn)用。每孔加100ul,置37℃避光反應(yīng)10分鐘。 9.每孔加終止液100μl,混勻,于450nm 測定各孔吸光值(OD值), 參考值 實驗正常的情況下,陽性對照OD-陰性對照OD>0.2。 檢驗結(jié)果的解釋 1. S/P=(樣本OD-陰性對照OD)/(陽性對照OD-陰性對照OD)。 2. S/P≥0.4時結(jié)果判讀為陽性。 3. 0.2<S/P<0.4時結(jié)果為疑似陽性;若接種過對應(yīng)疫苗,則提示抗體水平不足,建議補打疫苗。 4. S/P<0.2時結(jié)果判讀為陰性。 試驗方法的局限性 1. 本試劑盒僅作為被檢對象是否感染豬流感病毒的初步評估,具體情況請結(jié)合臨床。 2. 本試劑盒僅供研究使用,不得用于人體實驗。 注意事項 1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。 3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。 4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,必要時可于37℃水浴使結(jié)晶完全溶解。 5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。 6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。 7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。 8.不同批號試劑組分不得混用。 |