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小反芻抗體檢測試劑盒本試劑盒由預(yù)包被小反芻病毒重組蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測羊血清、血漿樣本中小反芻病毒抗體。
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商品說明
小反芻抗體檢測試劑盒 使用說明書 產(chǎn)品名稱 通用名:小反芻抗體檢測試劑盒 包裝規(guī)格 96T×1/盒 檢測原理 本試劑盒由預(yù)包被小反芻病毒重組蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測羊血清、血漿樣本中小反芻病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有小反芻病毒抗體,則將與酶標板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶標結(jié)合物反應(yīng)形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有小反芻病毒抗體。 試劑盒組成 儲存及有效期 2~8℃保存,有效期12個月。 包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。 適用儀器 含450nm波長的酶標儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。 樣品準備 1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。 2.用樣品稀釋液將待檢血清按50倍稀釋(如4μl血清加入196μl樣品稀釋液中,混勻)陰性、陽性對照不用稀釋。 3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水加1份濃縮洗滌液)。 檢驗方法 1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。 2.取所需用量酶標板條,設(shè)陰性、陽性對照各1孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。 3.陰性、陽性對照孔分別加入陰性、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。 4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃溫箱孵育30分鐘。 5.甩去孔內(nèi)液體,每孔加300ul工作洗滌液,靜置60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。 6.每孔加酶標記物100μl,置37℃避光反應(yīng)30分鐘。 7.甩去孔內(nèi)液體,每孔加300ul工作洗滌液,靜置60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。 8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,置37℃避光反應(yīng)10分鐘。 9.每孔加終止液100μl,混勻,空白孔調(diào)零后,于450nm 測定各孔吸光值(OD值), 參考值 實驗正常的情況下,陽性對照OD-陰性對照OD>0.2。 檢驗結(jié)果的解釋 1. S/P=(樣本OD-陰性對照OD)/(陽性對照OD-陰性對照OD)。 2. S/P≥0.4時結(jié)果判讀為陽性;0.2<S/P<0.4時結(jié)果考慮疑似感染;S/P<0.2時結(jié)果判讀為陰性。 試驗方法的局限性 1. 本試劑盒僅作為定性檢測羊血清、血漿中小反芻病毒抗體的粗略評估。 2. 本試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗。 注意事項 1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。 3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。 4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,使用時需恢復(fù)至室溫以完全溶解。 5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。 6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。 7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。 8.不同批號試劑組分不得混用。 |