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簡(jiǎn)要概述微生物培養(yǎng)基制備操作七大過程步驟

㈠把各種類型儲(chǔ)藏的母液分類整理好。

㈡置放各種類型干凈整潔的玻璃容器,如培養(yǎng)瓶/容量瓶/燒瓶/吸管/玻璃棒/布氏漏斗等。在規(guī)定的地方制作完成。需要準(zhǔn)備蒸餾水或去離子水\玻璃瓶蓋\封密膜\包裝紙袋\橡皮筋等。

㈢稱取規(guī)定量的瓊脂和蔗糖,將瓊脂置入細(xì)鋼鍋或電飯鍋中,向微生物培養(yǎng)基加水至器皿容積的四分之三或二分之一位置,隨后進(jìn)行加熱使其溶化,特別注意防止鍋底溢出。瓊脂務(wù)必徹底溶化,以防止?jié)舛戎挡痪。瓊脂(Agar)不適合過多,要不然微生物培養(yǎng)基會(huì)太硬,主要是過少的水分含量及自然通風(fēng)效果欠佳。恰恰相反,要是中海培養(yǎng)基太過柔軟,植物材料難以穩(wěn)固。充分考慮到瓊脂較難溶化,培養(yǎng)基制備時(shí)需要先進(jìn)行加熱溶化。

㈣按照母液先后順序,按照不一樣母液的濃度值倍數(shù),除去制定量,如制備1Lms微生物培養(yǎng)基,大量元素濃縮十倍的母液取一百毫升。增加母液后,估算后增加所需要的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。增加母液或生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑時(shí),事先常規(guī)檢查這樣的藥物有沒有變色或存在沉淀物,要是存在這樣的相關(guān)問題,不再使用。增加后,倒進(jìn)溶化的瓊脂中,隨后增加蔗糖。

㈥酸堿度值調(diào)控。微生物培養(yǎng)基的ph酸堿度可以直接影響到培養(yǎng)物對(duì)離子的消化吸收,因此 過酸或過酸會(huì)影響到植物生長(zhǎng)過程。不僅如此,瓊脂微生物培養(yǎng)基的酸堿度值也影響到其凝結(jié)干凅情況,于是中 海在制備微生物培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)該及時(shí)調(diào)節(jié)酸堿度值。通常酸堿度數(shù)值為5.6至6.0。*好是采用酸度計(jì)完成檢驗(yàn),如此一來既迅速又*。如果不是如此一來的專用設(shè)備,也能夠采用*的pH試紙,應(yīng)儲(chǔ)放在保持干燥的器皿中,防止因吸濕性而發(fā)揮不了作用。應(yīng)采用1mol/L氧化鈉調(diào)控微生物培養(yǎng)基的酸度,采用1mol/L鹽酸調(diào)控堿度。高壓蒸汽過濾除菌后,充分考慮到有些化學(xué)成分的分解掉,如蔗糖或氧化,微生物培養(yǎng)基的酸堿度值會(huì)降低約0.2。偶爾玻璃皿質(zhì)量差,一部分物質(zhì)的溶化也會(huì)影響到酸度的發(fā)生變化,中'海在調(diào)控微生物培養(yǎng)基的酸堿度值時(shí)要充分考慮到這一點(diǎn)。通常情況下,微生物培養(yǎng)基發(fā)育成熟后,高壓滅菌時(shí)會(huì)提升酸堿度值,以融入過濾除菌后酸堿度值降低的相關(guān)問題。關(guān)鍵漲幅需要按照我們自己的實(shí)驗(yàn)操作來不斷探索。

㈦微生物培養(yǎng)基單獨(dú)包裝。瓊脂在四十?dāng)z氏度左右以下凝結(jié),因此將制備好的微生物培養(yǎng)基要趁熱分開包裝。分開包裝時(shí)通常選擇燒瓶和布氏漏斗可以直接注入。要是前提條件容許,用培養(yǎng)基添充機(jī)分注會(huì)更方便快捷。包裝時(shí)要熟練掌握好注入量,過多就奢侈浪費(fèi)了。極大減少了培養(yǎng)物的生長(zhǎng)發(fā)育范圍;營(yíng)養(yǎng)成分缺失會(huì)影響到生長(zhǎng)發(fā)育,通常占培養(yǎng)器皿的四分之一至三分之一上下位置,培養(yǎng)器皿內(nèi)的微生物培養(yǎng)基壁厚在一點(diǎn)五厘米前后,分開包裝時(shí)特別注意避免將微生物培養(yǎng)基粘在管壁上,為了避免嚴(yán)重污染。分開包裝后,馬上堵上棉塞或玻璃瓶蓋或封密封密膜,給培養(yǎng)瓶貼標(biāo)簽或用油性筆在瓶外壁做標(biāo)記符號(hào),隨后過濾除菌。


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