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酶聯(lián)免疫實驗操作中復(fù)測問題分析㈠標(biāo)本問題 要嚴(yán)格規(guī)范正確處理樣本,預(yù)防血漿層大規(guī)模溶血和異物,使用一次性采樣槍頭,避免交叉污染。血清和血漿均可用于檢測,但血清的分離應(yīng)在血液完全凝固后進(jìn)行離心操作。
㈡試劑問題 保存并正確使用有效試劑。與金屬容器接觸的過期試劑和底物的使用,以及底物混合后較長的儲存時間都影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。中海選擇試劑時,應(yīng)選擇靈敏度高\(yùn)特異性好\穩(wěn)定性好\批間差異小的試劑。不同制造商的試劑不應(yīng)混合,包括底物和洗滌液。測試前,獸用診斷試劑應(yīng)在室溫下放置半小時進(jìn)行平衡,現(xiàn)在應(yīng)準(zhǔn)備好清洗液。同時中海生物觀察濃縮清洗液中是否有結(jié)晶。如果有結(jié)晶,放入三十七度的水浴中融化后再使用。
㈢操作問題 嚴(yán)格按照相關(guān)實驗室的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行試驗。中海生物技術(shù)人員添加樣品時,盡可能垂直添加樣品,并將其添加到涂層孔的底部。注意:不要過度用力破壞底部涂層材料,也不要將其添加到孔的上部和外部。
㈣溫浴問題 當(dāng)水浴箱用作溫水浴裝置時,應(yīng)注意水深對結(jié)果的影響。當(dāng)水浴箱中水的實測溫度為三十七度時,水面溫度可能只有三十四度,空氣溫度更低,甚至只有二十多度。因此當(dāng)水浴箱內(nèi)水位過低時,酶標(biāo)微孔板不會浸入水中,反應(yīng)溫度不會達(dá)到三十七度,會相應(yīng)影響酶促反應(yīng)。為了防止邊緣效應(yīng),酶聯(lián)免疫吸附試驗板應(yīng)盡可能浸入水中,從而保證加熱均勻。水浴中,海應(yīng)密封酶聯(lián)免疫吸附試驗板,防止水滴滴入包被孔或陽性樣品蒸發(fā)。嚴(yán)格控制暖浴時間,不要為了早出效果而隨意縮短暖浴時間。
㈤洗板機(jī)問題 廢液瓶裝滿后要及時倒空,防止廢液回流污染管道,導(dǎo)致沖洗不徹底,容易出現(xiàn)花板。洗完板后用蒸餾水徹底清洗管道,防止廢液殘留在管道內(nèi)。同時應(yīng)根據(jù)中海儀器維護(hù)程序定期維護(hù)洗衣機(jī)。
㈥酶標(biāo)儀問題 酶標(biāo)儀應(yīng)放在遮陽避光的地方,比色前應(yīng)打開預(yù)熱十五至三十分鐘,這樣測定結(jié)果會更穩(wěn)定。為防止顯色加深或減弱,顯色時間結(jié)束后應(yīng)立即滴止液,避免產(chǎn)生氣泡,十分鐘內(nèi)完成比色。將酶標(biāo)板從水浴箱中取出后,擦去孔底的水滴。如果有水滴或紙屑?xì)埩粼诳椎,酶?biāo)閱讀器的讀數(shù)就會出現(xiàn)錯誤,往往被誤判為花板。 |