一、夾心法根據(jù)操作步驟又分為一步法、兩步法、三步法，三者之間的區(qū)別歸納如下：

二、ELISA競(jìng)爭(zhēng)法和夾心法的區(qū)別：

競(jìng)爭(zhēng)法（competitive ELISA）：

小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少，的顯色也愈淺。

優(yōu)點(diǎn)：適用于小分子抗原，數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。

缺點(diǎn)：整體的敏感性和特異性都較差。

夾心法（sandwich ELISA）：

被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測(cè)抗體，此抗體可用酶標(biāo)記后直接測(cè)定抗原的量；或不標(biāo)記，再透過(guò)酶標(biāo)記的二抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)相同的抗原結(jié)合部位。

優(yōu)點(diǎn)：高靈敏、高特異性，抗原無(wú)須事先純化。

缺點(diǎn)：抗原一定得擁有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。

 競(jìng)爭(zhēng)法和夾心法的相同點(diǎn)：兩種方法都是檢測(cè)抗原物質(zhì)。

  不同點(diǎn)：競(jìng)爭(zhēng)法是用于檢測(cè)小分子抗原物質(zhì)，只有一個(gè)反應(yīng)位點(diǎn)，沒(méi)法用夾心法方法檢測(cè)。而大分子抗原更適用于夾心法（也可以用競(jìng)爭(zhēng)法），因?yàn)閵A心法實(shí)驗(yàn)結(jié)果特異性和靈敏度更好。

注意：不同物質(zhì)的適用原理可能不同，所以并沒(méi)有說(shuō)競(jìng)爭(zhēng)法的一定比夾心法做的結(jié)果好，同樣夾心法的也不一定比競(jìng)爭(zhēng)法的結(jié)果好。我根據(jù)不同項(xiàng)目用方法的盒子。

三：即用型標(biāo)準(zhǔn)品（稀釋好的液體標(biāo)準(zhǔn)品）和高濃度單試劑標(biāo)準(zhǔn)品（粉劑標(biāo)準(zhǔn)品）的優(yōu)劣勢(shì)

即用型：

優(yōu)勢(shì)：使用更加方便，拆開(kāi)即用不需要再另外稀釋?zhuān)�使用線(xiàn)性會(huì)更好

劣勢(shì)：保存時(shí)間比較短，穩(wěn)定性容易受保存條件和時(shí)間的影響

粉劑標(biāo)準(zhǔn)品： 

優(yōu)勢(shì)：保存時(shí)間更長(zhǎng)，試劑穩(wěn)定性更好，可根據(jù)需求配置自己的需要的標(biāo)準(zhǔn)濃度

劣勢(shì)：需要自己稀釋線(xiàn)性濃度，操作比較麻煩，稀釋線(xiàn)性容易出現(xiàn)問(wèn)題

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