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elisa溫育和洗板等步驟會(huì)影響其結(jié)果臨床elisa試劑盒測定現(xiàn)通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式,測定操作非常簡單,一般涉及到標(biāo)本的收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報(bào)告及解釋等方面,其中任一步驟的不當(dāng)都會(huì)影響測定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚,F(xiàn)分述如下。 一、臨床標(biāo)本的收集和保存 用于ELISA測定的臨床標(biāo)本*為常用的是血清(漿),有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、*、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。對用于*和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集,要注意收集時(shí)間甚或體位有可能會(huì)對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4~6點(diǎn)之間,會(huì)有一峰值出現(xiàn):生長*、促黃體*(LH)和促卵泡*(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,因此,在測定此類*時(shí),有必要在密切相連的時(shí)間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本,以其中間值為測定值。又如當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r(shí),血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高。再如治療藥物的檢測,應(yīng)根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)選擇服藥后的*適時(shí)間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測的血清標(biāo)本的收集則沒有時(shí)間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮以下幾個(gè)方面: (1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。 (2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免*污染,一則*的生長,其所分泌的一些酶可能會(huì)對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些*的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。 (3)血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時(shí)間保存,應(yīng)在-70℃以下。 (4)冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。 (5)標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)*污染所致的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。 4-氨基聯(lián)苯-d9 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-010408-52 1ml 蔗糖 標(biāo)準(zhǔn)品 CDCT-XA10173041AC 4 x 25ml 4-甲基苯酚/對甲酚 CDFX-ERT-004 5g 2,3,5,6-四lv苯酚 標(biāo)準(zhǔn)品 CDCP-F712-5g 100mg 5-Chloropyrimidi... CDFH-PLA72K 1g GPC標(biāo)樣-聚乳suan(Mw 727... 77649 250mg 5-Methyl-3-isoxa... CDGG-031638-02 500mg 喹硫磷 CDDM-M315035-500mg 1000mg/L;1ml 本文系本網(wǎng)編輯轉(zhuǎn)載,轉(zhuǎn)載目的在于傳遞更多信息,如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)和其它問題,請?jiān)?0日內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,我們將在*時(shí)間刪除內(nèi)容! |