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小反芻獸疫的流行病學及常見診斷方法

小反芻獸疫是由副黏病毒科麻疹病毒屬的小反芻獸疫病毒引起,以發(fā)熱、眼鼻黏膜卡他性炎癥、壞死性口炎、腹瀉和支氣管肺炎為主要特征,包括野生動物在內的小反芻動物的一種急性、烈性、致死性、高度接觸性傳染病。與小反芻獸疫同為麻疹病毒屬的成員還包括牛瘟病毒、人麻疹病毒、犬瘟熱病毒、海豹瘟病毒和海豚瘟病毒。其中小反芻獸疫與牛瘟具有相近的病理變化和臨床癥狀,兩者還具有血清學相關性。

小反芻獸疫是嚴重危害畜牧業(yè)生產安全的重大動物疫病,被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為法定報告的動物疫;目前防控主要依靠滅活苗或弱毒苗,但在實際應用中存在著免疫持續(xù)期短、熱穩(wěn)定性差、病毒毒力有返強風險等眾多缺陷;目前主要分布在非洲、阿拉伯、中東以及大陸在內的亞洲部分地區(qū)。

一、流行病學

1.1小反芻獸疫的地理分布

小反芻獸疫在1942年*次在非洲的象牙海岸被報道,隨后的調查發(fā)現小反芻獸疫廣泛流行于撒哈拉沙漠與赤道之間的大多數非洲國家。后來,小反芻獸疫的分布逐漸擴大到中東、伊朗、南亞次大陸、土耳其以及亞洲中部的部分國家。在亞洲,小反芻獸疫于1987年首次在印度南部地區(qū)出現,于1993年至1995年傳入阿拉伯半島、中東及南亞次大陸部分地區(qū)并成為了當地的地方性流行病。隨著小反芻獸疫全球范圍內的凈化,人們對小反芻獸疫的認識不斷加深,對其警性有所提高,相應的診斷技術也在不斷地改進,但更為頻繁的動物貿易、牲畜的季節(jié)性的遷移以及部分地區(qū)的游牧風俗為小反芻獸疫的傳播創(chuàng)造了許多條件,使之在全球范圍內的分布不斷擴大。近年來,小反芻獸疫跨國疫情多發(fā),于2000年首次在亞洲的塔吉克斯坦、尼泊爾、中國西藏暴發(fā)。在非洲,小反芻獸疫已遍及赤道以南的剛果(2006)、肯尼亞(2006)、烏干達(2007),撒哈拉北部的摩洛哥(2008)。

根據小反芻獸疫F蛋白、H蛋白和N蛋白基因的序列比對,將世界不同地域的小反芻獸疫流行毒株劃分為4個基因群。其中,20世紀70年代在非洲西部及近年在非洲中部分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅰ系;在西非的象牙海岸、幾內亞、布基納法索分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅱ系;在東部非洲的蘇丹、也門、阿曼分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅲ系;在阿拉伯半島、中東、亞州南部地區(qū)及非洲的摩洛哥分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅳ系。

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1.2易感動物

山羊和綿羊是小反芻獸疫的易感動物,山羊較綿羊感染性高且臨床癥狀較嚴重,但也有報道稱綿羊和山羊同樣易感,甚至在小反芻獸疫暴發(fā)流行時,某些山羊不被感染或僅出現較輕的感染癥狀,而綿羊卻表現出較高的發(fā)病率和死亡率。據報道,在實驗室給同一種山羊接種不同毒株,表現出了毒株間的毒力差異,相應的不同種的山羊對同一毒株產生不同的反應。對牛和豬人工接種或接觸感染,皆不發(fā)病,但產生抗體,也不散毒。目前,由于對小反芻獸疫易感的野生動物種類信息不全面,報道過感染小反芻獸疫的野生動物主要有印度水牛、單峰駱駝、小鹿瞪羚、湯氏瞪羚、努比亞北山羊、大羚羊、美洲白尾鹿、中國巖羊。

1.3傳播方式

傳播方式主要是接觸傳播,可通過與病羊直接接觸發(fā)生傳播,病羊的鼻液、糞尿等分泌物和排泄物可含有大量的病毒,與被病毒污染的飼料、飲水、衣物、工具、圈舍和牧場等接觸也可發(fā)生間接傳播,在養(yǎng)殖密度較高的羊群偶爾會發(fā)生近距離的氣溶膠傳播。但與口蹄疫病毒傳播有區(qū)別,小反芻獸疫不能在空氣中長時間存活,不能通過氣溶膠長距離的傳播;因此在防控上做好養(yǎng)殖場及牧場的飼養(yǎng)欄舍、活動場地、飲水設施以及交通工具的消毒及管理,可有效防控小反芻獸疫的感染。

1.4潛伏期

小反芻獸疫一年四季均可發(fā)生,但多雨季節(jié)和干燥寒冷季節(jié)多發(fā)。潛伏期為4-5天,最長可達21天,《陸生動物衛(wèi)生法典》規(guī)定為21天。如同其它動物傳染病,首次入侵時,所有易感性羊群會大爆發(fā)本病,一旦病原存在后,變?yōu)樯l(fā),隨季節(jié)性羊羔的出生而病例增加。

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二、診斷方法

根據小反芻獸疫的流行病學特點、臨床癥狀和剖檢病變等,可作出初步診斷。但應注意與巴氏桿菌病、傳染性羊胸膜肺炎、羊傳染性*、藍舌病和口蹄疫等作鑒別診斷。目前本病的實驗室診斷方法主要有以下幾種。

2.1樣品采集

以拭棒刮取睫膜炎分泌物及鼻、口腔及直腸等拭子,以及剖檢采取淋巴結、扁桃腺、脾、肺、大腸等組織塊,以干冰或冰袋冷藏送至實驗室。供病理切片的組織則以10%中性福爾馬林液保存及輸送。另采取抗凝血劑制備的全血,供病毒分離、血液學及血清學使用。

小反芻獸疫抗體快速檢測卡4.jpg

2.2常規(guī)診斷

PPRV的常規(guī)診斷技術主要有瓊脂免疫擴散試驗(AGID)、病毒分離鑒定和膠體金試紙條等。

AGID的敏感性相對較低,因此基本不用于標準診斷。血凝試驗(HA)和血凝抑制試驗(HI)可用于日常監(jiān)測,此兩種技術易操作、花費少、敏感性也相對較高。

病毒分離培養(yǎng)通常采用非洲綠猴腎細胞(Vero細胞)進行。Sreenivasa 等于2006 年,研究發(fā)現改造過的狨猴B 淋巴細胞衍生細胞系MarmosetB95a細胞更利于PPRV 的繁殖和分離。應用此方法鑒定比較準確,但相對費時費力,不適用于PPRV 的快速檢測。

在膠體金試紙條方面,研究者成功地建立了一種特異、快速檢測PPRV抗原膠體金免疫層析試紙條。此方法與病毒分離方法相比,縮短了PPRV 抗原檢測時間、降低了檢測成本和檢測環(huán)境要求,是PPRV 檢測方法的完善,也是PPR快速診斷方法之一。

2.3病原學診斷

病原診斷主要包括特異性的cDNA 探針雜交、RT-PCR、實時熒光定量PCR、環(huán)介導等溫擴增技術(LAMP)、RT-PCR-ELISA 和抗原捕獲ELISA等。分子生物學技術雖然耗時短、靈敏度高、特異性強,但由于樣品易污染、RNA易降解等可造成不準確結果,而且檢測設備要求高、專業(yè)性要求強、檢測成本高,難以適用于大規(guī)模流行病學調查和檢驗檢疫。

2.4血清學診斷

PPRV抗體血清學診斷方法包括間接熒光抗體試驗(IFAT)、對流免疫電泳試驗(CIEP)、病毒中和試驗(VNT)和ELISA 等。其中,IFAT 和VNT 雖然是鑒別診斷PPRV 和RPV 的可靠方法,但由于此兩種方法操作復雜、耗時長、設備要求高,不適于大量樣品的檢測;而VNT 是國際貿易中要求進行的一項檢測試驗,該法靈敏度高、特異性強,但十分耗時。ELISA 方法相比上述幾種方法更加方便、快捷,適用于大量樣品的檢測診斷。

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三、小結       

小反芻獸疫已經嚴重影響了我國羊養(yǎng)殖業(yè),制約著羊養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展,近期中國多地暴發(fā)小反芻獸疫疫情為我們敲起了警鐘。本文通過從該病的病原、流行病學、診斷方法等幾個方面進行闡述,為小反芻獸疫的認識和防控提供指導。目前,小反芻獸疫目前尚無有效的治療方法,當小反芻獸疫爆發(fā)前,快速確診,緊急建立免疫帶,才能有效控制該病在我國的傳播。

當前的小反芻獸疫防控措施不夠完善,建立和研究更多的防控方法成為當今科研的重中之重。雖然已有的多種新型疫苗,并在PPR的預防方面表現出較好的效果,但力求新型高效的疫苗成為科研工作的發(fā)展目標。平時做好 PPR防疫監(jiān)測與風險評估工作,做好生物安全等防疫工作,同時要加強對抵抗和防御外來病的宣傳和教育,從源頭防止此病的發(fā)生。

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