口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的嚴(yán)重、急性、熱性和接觸性傳染病，被OIE列為應(yīng)報(bào)告?zhèn)魅静�。它在世界上許多國家或地區(qū)發(fā)生并流行，給水產(chǎn)養(yǎng)殖和相關(guān)產(chǎn)業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。
 
中國實(shí)施強(qiáng)制免疫以預(yù)防和控制口蹄疫。免疫后產(chǎn)生的抗體水平是評價(jià)疫苗質(zhì)量和免疫效果的重要手段，也是制定合理免疫程序的科學(xué)依據(jù)。對于免疫抗體的檢測，由于檢測方法不同，結(jié)果往往有偏差。因此，選擇準(zhǔn)確可靠的檢測方法是科學(xué)評估免疫質(zhì)量的基礎(chǔ)。
 
在本試驗(yàn)中，使用FMD抗體液相阻斷ELISA試劑盒和FMD病毒抗體ELISA試劑盒（VP1結(jié)構(gòu)蛋白亞基ELISA）檢測并分析了FMD抗體O型和A型抗體。
 
1、 檢測方法
 
1.液相阻斷ELISA
 
目前，國際糧食及農(nóng)業(yè)組織（FAO）、世界動物衛(wèi)生組織、國家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部等權(quán)威機(jī)構(gòu)推薦液相阻斷ELISA來評估口蹄疫的免疫效果。研究表明，F(xiàn)MD液相阻斷ELISA抗體檢測技術(shù)具有良好的靈敏度和重復(fù)性，并與病毒攻擊防護(hù)具有良好的相關(guān)性。目前廣泛應(yīng)用于口蹄疫免疫抗體水平的監(jiān)測。該方法旨在檢測口蹄疫全病毒滅活疫苗的抗體。由于整個(gè)病毒顆粒含有多個(gè)抗原位點(diǎn)，只有通過對多個(gè)抗體的定性和定量檢測，才能真正測量血清中的抗體含量，從而客觀反映免疫后機(jī)體抵抗病毒感染的能力。
 
2.口蹄疫病毒抗體ELISA（VP1結(jié)構(gòu)蛋白亞基ELISA）
 
根據(jù)VP1蛋白中和表位A位點(diǎn)（141-160）設(shè)計(jì)了口蹄疫病毒（FMDV）O/A抗體ELISA試劑盒，采用固相阻斷ELISA法檢測結(jié)構(gòu)蛋白抗體。用ELISA法檢測口蹄疫結(jié)構(gòu)蛋白抗體，不僅靈敏度高、血清型特異，適合大規(guī)模樣品檢測，而且具有快速、易操作、結(jié)果穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。然而，這種方法受到疫苗株的影響。對于不同的疫苗，抗體檢結(jié)果存在差異。
 
2、 示例背景
 
一個(gè)養(yǎng)殖場分別提供30日齡、60日齡、90日齡和120日齡商品豬血清樣本15份，母豬血清樣本10份，共70份。
 
3、 測試計(jì)劃
 
上述兩種方法用于檢測FMD O型和A型免疫抗體。同樣的方法分為初始測試和重新測試。
 
4、 測試結(jié)果
上述結(jié)果表明，兩種方法對O型和A型口蹄疫抗體的平均符合率分別為77.4%和39.3%。
 
5、 分析和討論
 
1.根據(jù)檢測結(jié)果，兩種方法之間存在一些差異，這主要是由于兩種方法在抗原類型方面的差異造成的。整個(gè)病毒包含多個(gè)抗原-抗體反應(yīng)結(jié)合位點(diǎn)，而VP1結(jié)構(gòu)蛋白亞基抗原-抗體結(jié)合位點(diǎn)相對單一。
 
2、兩種方法的O型抗體檢測結(jié)果符合率遠(yuǎn)高于A型抗體檢測。不同方法的A型抗體檢測結(jié)果差異較大的原因主要是疫苗株和試劑盒中選擇的株之間抗原匹配的差異。
 
3.對于O型抗體，兩種方法的符合率為77.4%，兩者之間有很高的對應(yīng)性。因此，這兩種方法都可以監(jiān)測和評估FMD O型免疫抗體。
 
4.對于A型抗體，兩種方法的符合率為39.3%，且兩種方法之間的對應(yīng)關(guān)系不明顯。測試結(jié)果截然不同。建議使用液相阻斷ELISA檢測FMD A型免疫抗體，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。