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影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的因素有哪些

ELISA試劑盒也稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。通過幾年的實(shí)驗(yàn),上海蜀華生物得出結(jié)論,影響ELISA測試的主要因素如下:
 
1、 試劑盒
 
1.抗原和抗體活性對滴度的影響主要是由于試劑中抗體(或抗原)滴度的降低或失活,這使得難以區(qū)分結(jié)果。此外,ELISA試劑盒對雜質(zhì)具有高靈敏度和高響應(yīng)靈敏度。在測試中,空白對照的OD值高或假陽性;
2.如果酶綴合物的濃度過高,OD值也會被錯誤地增加。
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2、 測試儀器
 
1.進(jìn)樣器是否通過校準(zhǔn),ELISA用血量小。如果手動進(jìn)樣器的功能不好,樣本沒有被吸收,結(jié)果會有高有低;
 
2.每次洗滌前,檢查洗衣機(jī)的針孔是否堵塞。
 
3、 ELISA試劑盒操作
 
1.測試前,將試劑盒從冰箱中取出,在室溫下放置20分鐘,然后使用。試劑用完后,及時放回冰箱冷藏,避免檢測結(jié)果假下降;
 
2、添加樣品時,注意不要觸摸涂層板的底部,以免劃傷涂層材料,導(dǎo)致抗體(抗原)掉落,影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性;
 
3.洗滌不足會導(dǎo)致結(jié)果的虛假增加,過度洗滌會是假陰性;
 
4.比色時,涂層孔底部應(yīng)無異物和水汽。尤其是當(dāng)盤子在冬天從37℃的水浴中取出時,底部會殘留水蒸氣。比色前,應(yīng)將板底擦干?字械乃魵饣驓馀菀矔黾覱D值;
 
5.抗原和抗體反應(yīng)之間的完全平衡取決于溫度和時間。如果溫度高于45℃,則容易導(dǎo)致失活和符號掉落。如果溫度低于4℃,則會影響反應(yīng)速度。

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