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關(guān)于布病抗體的檢測方法,哪種更合適您?

布魯氏菌病(簡稱布。﹪(yán)重危害畜牧養(yǎng)殖業(yè)安全和人類健康,而有效的檢測方法能夠為布病的預(yù)防、檢測和凈化提供技術(shù)支持。


布病檢測方法很多,包括膠體金試紙條檢測、酶聯(lián)免疫檢測方法、布病虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗、全乳環(huán)狀實驗等,在眾多檢測方法中,膠體金試紙條檢測法最為簡單方便,其檢測準(zhǔn)確性如何?


布病抗體檢測卡檢測結(jié)果準(zhǔn)確性如何?一起來關(guān)注——


布魯氏菌病抗體檢測方法有那些? 


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01免疫膠體金檢測技術(shù)(GICA)


免疫膠體金檢測技術(shù)是基于抗原抗體檢測的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù),在生物醫(yī)學(xué)的各領(lǐng)域得到了日益廣泛的應(yīng)用。


膠體金法將布魯氏菌抗原固定在NC濾膜上,當(dāng)待測樣本存在布魯氏菌病抗體時,血清抗體將會有固定在NC膜上的抗原結(jié)合形成復(fù)合物,在膠體金顆粒的加持下,會顯色出紅色條帶,進(jìn)而判定樣本中是否存在抗體。GICA 具有高靈敏度、血清用量更少、適于現(xiàn)場操作、檢測樣品廣泛(部分GICA 產(chǎn)品檢測范圍可以涵蓋血清、全血、奶樣等不同樣品)等優(yōu)勢。


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02酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)

用于布病檢測的 ELISA 有兩種:

①間接 ELISA(i ELISA)

②競 爭 ELISA(c ELISA)


i ELISA是待檢血清樣本中的布魯氏菌抗體與 ELISA 板上固定的布魯氏菌抗原物質(zhì)結(jié)合,利用酶標(biāo)抗體檢測,然后通過底物顯色,最后用酶標(biāo)儀來讀值。i ELISA 靈敏度較高,標(biāo)記的抗體較少,成本更低,但是試驗周期更長。c ELISA 步驟較復(fù)雜,但可以檢測含有布魯氏菌抗體的不純凈血清,數(shù)據(jù)再現(xiàn)性更高,但是整體敏感性和特異性稍低。


ELISA 檢測布病的敏感性較高,用酶標(biāo)儀判定試驗結(jié)果,避免了肉眼觀察判定結(jié)果的誤差,但對專業(yè)儀器要求較高,檢測試劑比較昂貴,增加了檢測成本,此外檢測過程中對環(huán)境溫度的要求也較高,因而限制了ELISA 的使用。


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03虎紅平板凝集試驗(RBPT)


虎紅平板凝集試驗是一種經(jīng)典的血清凝集試驗,靈敏度高、價格便宜、操作方便。但受試驗溫度和凝集時間相對較短的影響,不易準(zhǔn)確判定 結(jié)果,而且受操作人員的主觀判斷影響比較大,故常作為篩選試驗,適用于具有專業(yè)知識背景的試驗人員用于高危動物篩查及流行病學(xué)的研究。


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04試管凝集試驗(SAT)


試管凝集試驗是一種檢測血清中布魯氏菌抗體的方法。布魯氏菌抗原能夠與血清中的IgM抗體反應(yīng)產(chǎn)生凝集現(xiàn)象,通過肉眼觀察試管中的凝集現(xiàn)象可做出結(jié)果判定。試管凝集試驗特異性較強(qiáng),不易受其他干擾因子影響,陽性結(jié)果比較準(zhǔn)確。


但試管凝集試驗也存在一定的不足,如每個血清樣本需要4支試管來實現(xiàn)4個梯度的試驗,在進(jìn)行大批量樣本檢測時,需要大量的試管,試驗過程中還需要24h的孵育時間,不僅對耗材的需求量較大,且試驗時間也較長。


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05全乳環(huán)狀試驗(MRT)


全乳環(huán)狀試驗主要通過檢測牛奶樣本中的抗體來實現(xiàn)布病檢測,且一般僅用于奶牛的布病檢測,不適用于其他品種家畜。如果待檢牛奶樣本中存在布魯氏菌抗體,就會與試驗用的紅色布魯氏菌抗原形成復(fù)合物,這些復(fù)合物會形成紫紅色的乳脂環(huán),從而實現(xiàn)布病檢測。相比較于其他需要血清的檢測方法;


全乳環(huán)狀試驗具有一定的優(yōu)勢,無論是單一奶牛的牛奶還是混合的大缸奶,都能實現(xiàn)布病檢測,無需采血,不會使奶牛因驅(qū)趕、保定、采血等行為產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng),使奶牛產(chǎn)量不受影響,養(yǎng)殖戶更容易接受。


全乳環(huán)狀試驗的敏感性能夠滿足大型牛場布病的現(xiàn)場篩查,特異性較強(qiáng),操作快捷而簡便,試劑成本不高,試驗結(jié)果可靠準(zhǔn)確,全乳環(huán)狀試驗是一種能夠代替試管凝集試驗(SAT)的布病檢測方法。但是,如果牛奶樣本存放時間較長,或試驗溫度較高導(dǎo)致牛奶樣本腐敗,檢測結(jié)果就可能出現(xiàn)假陽性。當(dāng)牛奶樣本中存在的初乳較多或者混合樣本量較大時,也有可能出現(xiàn)一定的假陽性結(jié)果。


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布魯氏菌病作為人畜共患病,檢測的方法包括抗原檢測法和血清/全血抗體檢測法兩大類型。其中病原檢測需要在專業(yè)的P3實驗室或者專業(yè)的儀器配備相應(yīng)人才檢測等條件限制了此種檢測方法的應(yīng)用范圍,才導(dǎo)致了布魯氏菌病血清檢測法成為布魯氏菌病診斷的采用方法。


布病血清/全血抗體檢測的方法很多,膠體金法由于其操作便捷性和較高性價比,勢必逐步取代傳統(tǒng)虎紅平板法被用作現(xiàn)場布魯氏菌病的快速篩查的檢測產(chǎn)品。


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