酶聯(lián)免疫診斷技術(shù)的發(fā)展

酶聯(lián)免疫吸附診斷技術(shù)是以酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）為基礎(chǔ)的測定技術(shù)。由于抗體可以高度特異與抗原分子結(jié)合，因此通過抗原-抗體的特異性識別反應(yīng)來進行檢測就可以成為一種簡便的檢測程序。

酶聯(lián)免疫吸附試驗，創(chuàng)始于1971年，當時，瑞典學(xué)者Engvail和Perlmannn，荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法，稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗。1974年Voller等又將固相支持物改為聚苯乙烯微量反應(yīng)板，使ELISA技術(shù)得以推廣應(yīng)用。ELISA是免疫測定技術(shù)中應(yīng)用最廣，最有發(fā)展前途的一種技術(shù)，可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

最初發(fā)展的免疫酶測定方法，是使酶與抗體或抗原結(jié)合，用以檢查組織中相應(yīng)的抗原或抗體的存在。后來發(fā)展為將抗原或抗體吸附于固相載體，在載體上進行免疫酶染色，底物顯色后用肉眼或分光光度計判定結(jié)果。

酶聯(lián)免疫測定方法及原理

酶免疫測定方法的基本原理是：先將已知的抗體或抗原結(jié)合在某種固形載體上，并保持其免疫活性。測定時，將待檢標本和酶標抗原或抗體按不同步驟與固相載體表面吸附的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)。用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離成分。然后加入底物顯色，根據(jù)顏色深淺進行定性或定量測定。

自1971年酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)建立以來，其技術(shù)已經(jīng)日趨成熟，最經(jīng)典的當屬Clark和Adams于1977年建立的雙抗原夾心法。后來人們又建立了許多改進的方法，成功地用于病毒的檢測與鑒定。根據(jù)檢測目的和操作步驟的不同，常用的酶聯(lián)免疫吸附測定方法有兩種類型。用于測定抗原的技術(shù)類型有雙抗體夾心法、雙位點一步法和競爭法；用于測定抗體的技術(shù)類型有間接法、雙抗原夾心法和競爭法。此外，還有捕獲法。