①病毒污染擴(kuò)散，流行毒株變異

據(jù)中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心等機(jī)構(gòu)公開報(bào)道，2020年下半年，國(guó)內(nèi)豬群非洲豬瘟病毒毒株已明顯呈多樣性，經(jīng)典強(qiáng)毒株和變異株共存，變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒株等。

②非瘟強(qiáng)毒株的臨床表現(xiàn)

流行毒株的多樣性，加大了非洲豬瘟臨床表現(xiàn)的復(fù)雜性。非洲豬瘟強(qiáng)毒株臨床表現(xiàn)為最急性和急性型：感染后通常3-5天就會(huì)表現(xiàn)出明顯的癥狀，體溫升高達(dá)42℃，精神沉郁，厭食，皮膚發(fā)紅，耳、四肢、腹部皮膚有出血點(diǎn)，嘔吐等，病死率極高。一般2-3天血液病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性，3-4天出現(xiàn)發(fā)熱等癥狀，4-5天口腔及肛拭子樣品病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性，6-10天左右感染豬大部分發(fā)病死亡；同居接觸豬同樣全部發(fā)病、死亡。同居豬只感染時(shí)間的早晚不同一般口腔拭子6天后、血液9天后、肛拭子10天后ASFV核酸陽(yáng)性。非洲豬瘟強(qiáng)毒株感染、發(fā)病、排毒比較有規(guī)律，隨著病程的發(fā)展，排毒量增加，Ct值減小。這也是非洲豬瘟早期檢測(cè)和精準(zhǔn)清除的基礎(chǔ)。

③非瘟變異弱毒株的臨床表現(xiàn)

變異株相比典型強(qiáng)毒致病力降低，但仍具有明顯的殘留毒力，同樣具有很強(qiáng)的水平傳播能力。這些變異株臨床表現(xiàn)具有一定的隱蔽性，排毒量較低，也不規(guī)律，早期診斷困難，為我國(guó)非洲豬瘟防控帶來(lái)全新的挑戰(zhàn)。面對(duì)非洲豬瘟弱毒株的防控，豬場(chǎng)需科學(xué)認(rèn)識(shí)、放棄幻想、嚴(yán)防死守，避免無(wú)妄之災(zāi)。 

二、核酸檢測(cè)方案優(yōu)化

①根據(jù)當(dāng)前非洲豬瘟流行的情況，在樣品采集、檢測(cè)重點(diǎn)、檢測(cè)方法、檢測(cè)質(zhì)量控制等方面要進(jìn)一步優(yōu)化，嚴(yán)格控制。

②對(duì)于非洲豬瘟的防控*是將病毒擋在場(chǎng)外面，豬場(chǎng)應(yīng)減少場(chǎng)內(nèi)外人員、物資進(jìn)出的頻次，強(qiáng)化人員、車輛、物資管理，有效消毒嚴(yán)格檢測(cè)。

③場(chǎng)內(nèi)也要做好環(huán)境的檢測(cè)，對(duì)圈舍、倉(cāng)庫(kù)、藥房等區(qū)域采樣檢測(cè)。每周對(duì)豬群進(jìn)行病原和抗體檢測(cè)。豬群轉(zhuǎn)群、分娩、免疫等應(yīng)激會(huì)促進(jìn)非洲豬瘟病毒的復(fù)制，因此可以在豬群受到應(yīng)激刺激后第2-3天內(nèi)及時(shí)采咽拭子、尾根血、胎衣液等樣品檢測(cè)，以提高檢出率。

④對(duì)可疑豬，按檢出概率高低排序，依次采集深部咽拭子、淋巴結(jié)（微創(chuàng)采集）、前腔靜脈抗凝血（EDTA）或尾根血、口鼻拭子。對(duì)分娩母豬，應(yīng)采集臍帶血、胎衣；對(duì)死胎和流產(chǎn)胎兒，應(yīng)采集淋巴結(jié)、脾臟等組織樣品。在采樣的過(guò)程中一定要防止交叉污染。

⑤提高樣品檢測(cè)的準(zhǔn)確性。（1）非洲豬瘟熒光PCR檢測(cè)室應(yīng)分為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品處理區(qū)和核酸擴(kuò)增檢測(cè)區(qū)，各功能區(qū)間需物理隔離；（2）要規(guī)范處理樣品，棉拭子要加生理鹽水震蕩浸泡，如果做混檢，混樣數(shù)量盡量不要超過(guò)5個(gè)；（3）要選擇靈敏性高的核酸提取試劑盒，不同的提取試劑盒差異比較大，現(xiàn)在多采用磁珠法，用核酸提取儀自動(dòng)提��；有條件時(shí)*每次加一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照，對(duì)核酸提取的過(guò)程進(jìn)行監(jiān)控；（4）采用熒光PCR擴(kuò)增試劑盒檢測(cè)，可用P72單重?zé)晒釶CR，P72-CD2V雙重?zé)晒釶CR或者P72-CD2V-MGF三重?zé)晒釶CR方法；可以適當(dāng)增加熒光PCR檢測(cè)的循環(huán)數(shù)，提高其敏感性；（5）一定要嚴(yán)控實(shí)驗(yàn)室污染，移液器用帶濾芯的槍頭，各區(qū)間的加樣器不要混用，擴(kuò)增檢測(cè)后的PCR管嚴(yán)禁開蓋，保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的整潔和衛(wèi)生，定期用84消毒液和酒精對(duì)實(shí)驗(yàn)室消毒。

⑥檢測(cè)結(jié)果要和豬群生產(chǎn)數(shù)據(jù)、臨床表現(xiàn)結(jié)合起來(lái)。非洲豬瘟的檢測(cè)只針對(duì)采樣時(shí)的狀態(tài)，而疾病的發(fā)生、發(fā)展有一個(gè)過(guò)程；也可能因?yàn)椴蓸淤|(zhì)量低，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)不規(guī)范，檢測(cè)試劑盒不敏感，操作失誤等出現(xiàn)假陰性；而實(shí)驗(yàn)室污染則可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果與豬群臨床表現(xiàn)和生產(chǎn)數(shù)據(jù)等不相符時(shí)，要注意重新檢測(cè)復(fù)核。

三、非洲豬瘟抗體檢測(cè)

ASFV抗體在感染早期（7-10天）就可被檢測(cè)到，并且會(huì)持續(xù)相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間。而ASFV抗體陽(yáng)性，是機(jī)體感染該病毒的最直接證據(jù)�？贵w檢測(cè)是病毒核酸檢測(cè)的重要補(bǔ)充，通常用于引種檢測(cè)，基因缺失毒株感染檢測(cè)。目前，很多規(guī)模場(chǎng)已將非洲豬瘟抗體的檢測(cè)列入日常監(jiān)測(cè)項(xiàng)目。

總的來(lái)說(shuō)，非洲豬瘟核酸和抗體的科學(xué)、及時(shí)、準(zhǔn)確監(jiān)測(cè)是豬場(chǎng)防非降本的重要技術(shù)手段。對(duì)于非洲豬瘟核酸陽(yáng)性的豬群不要抱有幻想，即使是變異弱毒株，其對(duì)豬群生產(chǎn)成績(jī)?cè)斐傻挠绊懸彩菬o(wú)法估量的。當(dāng)前，非洲豬瘟強(qiáng)毒株精準(zhǔn)清除措施仍然有效。種豬場(chǎng)對(duì)于非洲豬瘟變異株的防控應(yīng)更加嚴(yán)格，很多豬場(chǎng)發(fā)現(xiàn)時(shí)疫病已經(jīng)擴(kuò)散，因此，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性豬舍，要做好整棟清除的計(jì)劃；對(duì)陰性豬舍，可實(shí)施封場(chǎng)管理，但要做好相應(yīng)線路規(guī)劃和物理分隔；靜默生產(chǎn)時(shí)間至少一個(gè)月。豬場(chǎng)應(yīng)將非洲豬瘟核酸檢測(cè)和抗體檢測(cè)列入日常監(jiān)測(cè)項(xiàng)目，一旦有異常情況，要及時(shí)采取相應(yīng)措施。