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非瘟檢測,一個樣本的費用多少?豬病檢測知識知多少?目前豬場或檢測機(jī)構(gòu)主要開展的檢測項目及方法介紹先來看一下檢測項目和方法 檢測項目里,一方面就是抗體監(jiān)測。目前主要用的是酶聯(lián)免疫吸附試驗,就是ELISA。通過抗體檢測,一方面可以評估豬場的抗體水平,同時還可以判斷豬場是否有野毒感染。 表1展示了曾經(jīng)為一家豬場做的藍(lán)耳病抗體檢測。針對藍(lán)耳病,有些豬場在用疫苗,有些豬場沒有用疫苗,所以檢測到抗體之后,要進(jìn)行綜合分析:如果有抗體檢出,要了解豬場的免疫情況,如果沒有免疫過疫苗,有抗體檢出,應(yīng)該說豬場有感染,把它稱為感染抗體,判斷是否感染有經(jīng)驗值,S/P≥2.5就證實豬場有感染;如果說豬場免疫過疫苗,有抗體檢出,應(yīng)該就是免疫產(chǎn)生的抗體。 表1 某豬場藍(lán)耳抗體檢測結(jié)果
表2是為豬場所做的偽狂犬抗體檢測。對于偽狂犬抗體檢測,目前我國有這么兩類檢測試劑盒,一是檢測gB抗體,指的是免疫所產(chǎn)生的抗體,另外是gE抗體,主要指的是感染產(chǎn)生的抗體。目前我國用偽狂犬的基因缺失疫苗來進(jìn)行免疫,與此同時可以檢測gE抗體,如果說有g(shù)E抗體檢出,就證實豬場中有偽狂犬野毒感染。 表2-1 偽狂犬gB抗體監(jiān)測(免疫抗體)
表2-2 偽狂犬gB抗體檢測gE抗體監(jiān)測(感染抗體)
第2個檢測項目是抗原檢測,可以用于疾病的診斷,包括流行病學(xué)調(diào)查,同時可以通過定量PCR檢測方法對疫苗中抗原含量進(jìn)行評價,比如有些豬場使用實時熒光定量PCR的方法來進(jìn)行抗原含量檢測。目前PCR的檢測方法分為普通PCR和實時熒光定量PCR,如很多實驗室自建的等溫檢測方法,包括LAMP以及重組酶介導(dǎo)的等溫擴(kuò)增(RPA),這兩類方法敏感性比較高,但也會出現(xiàn)假陽性的情況。所以在臨床中,普遍采用的是PCR和實時熒光定量PCR進(jìn)行抗原檢測。 第3個,目前在檢測過程中也可以做耐藥性分析。耐藥性分析主要通過藥敏實驗,為*病的防控來篩選敏感藥物。可以用發(fā)病豬的組織涂抹相應(yīng)的培養(yǎng)基,然后貼上藥敏片,最后根據(jù)藥敏片抑菌圈的大小來判定什么樣的藥比較敏感,也可以分離*來做藥敏實驗。 第4個就是基因測序,目前在豬中用的最多的就是對藍(lán)耳病病毒的測序。通過測序,可以分析藍(lán)耳病病原的變異情況,從而在臨床中篩選匹配的疫苗。大家知道,藍(lán)耳病是在豬中危害比較大的傳染病,從1996年傳入我國之后,藍(lán)耳病的毒株具有多樣性。目前,在臨床中主要有三個毒株,一是經(jīng)典毒株,二是高致病毒株,還有類NADC30毒株。 在藍(lán)耳疫苗的使用過程中,有兩類疫苗,經(jīng)典毒株疫苗和高致病性毒株疫苗,到底該選擇哪個?我的觀點是這樣的:可以根據(jù)豬場中藍(lán)耳病的流行情況,選擇相應(yīng)的毒株,比如說豬場中主要發(fā)生和流行的是經(jīng)典毒株,就可以用經(jīng)典毒株的疫苗去免疫防控,如果流行的是高致病毒株,就可以選擇高致病毒株的疫苗進(jìn)行防控。因此有必要對它的基因進(jìn)行分析,目前主要是分析NSP2以及GP5基因。 以上是目前豬場或者檢測機(jī)構(gòu)主要開展的檢測項目,以及使用的方法。 針對這些項目,檢測機(jī)構(gòu)就有相應(yīng)的平臺,包括洗滌消毒室、病原學(xué)檢測室、血清學(xué)檢測室,另外還有分子生物學(xué)檢測實驗室,有些單位還有病理學(xué)檢測實驗室。依靠這樣的平臺,就可以從事血清學(xué)、*學(xué)、病毒學(xué)、分子生物學(xué)的檢測,并能評估耐藥風(fēng)險,因此可以為豬場提供相應(yīng)的服務(wù)。目前大多數(shù)檢測機(jī)構(gòu),對常發(fā)的病,比如藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒、豬瘟、偽狂犬、細(xì)小、乙型腦炎等都可以進(jìn)行檢測。 - 以下是部分問答 - 答:現(xiàn)在基層生產(chǎn)中由于缺乏相應(yīng)的檢測平臺,所以這方面會有一定的困難,建議如果在生產(chǎn)中沒有檢測設(shè)備可以用檢測試劑條進(jìn)行初步的篩查,確診就需要將收集的樣本送到專業(yè)的實驗室來進(jìn)行檢測。 答:對于病原檢測目前用到的試劑盒有兩大類:一是核酸類的檢測試劑盒,另一個是檢測卡。核酸的檢測試劑盒包括PCR、實時熒光定量PCR兩類,檢測費用在200元左右?贵w檢測主要用的是酶聯(lián)免疫吸附實驗,樣本的費用大概是30~50元。 答:豬場在送檢的時候可能會把同樣的樣本送給2~3家或者更多的單位進(jìn)行檢測。關(guān)于檢測誤差有以下幾個方面的因素:*是與送檢的樣本有很大的關(guān)系,同一頭豬采取樣本的部分不同可能檢出的結(jié)果就不同;第二是盡量送檢到正規(guī)的檢測機(jī)構(gòu)來進(jìn)行檢測,如果自行檢測,*購買正規(guī)的檢測試劑盒,來避免檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差。 答:中和抗體是豬得到保護(hù)很重要的抗體,但在臨床檢測中對中和抗體檢測的還不是很多。 答:膠體金指的就是檢測卡,它的特點是快速,基本上5分鐘就可以出結(jié)果,主要是基層或是現(xiàn)場的快速診斷。但是跟目前抗原檢測類的比較起來,它的敏感性較差,不夠準(zhǔn)確。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部在第1批所發(fā)布的非洲豬瘟中國檢測試劑盒中曾經(jīng)也做過比對實驗,檢測卡的敏感性在66%~67%。 答:組織做藥敏試驗是目前藥敏實驗中很重要的方法,這種方法比較快,今天做明天就可以出結(jié)果。如果需要精準(zhǔn)*是用純培養(yǎng)物來做,但在臨床中涉及到要及時的防控,需要迅速出結(jié)果,建議選取有代表性的樣品組織。藥敏實驗對培養(yǎng)基選擇也是很重要的,需要給*培養(yǎng)提供充足的營養(yǎng)因子如血清等。 答:這個問題也是廣大養(yǎng)殖戶普遍關(guān)心的問題,就是送檢結(jié)果可能跟他預(yù)想的可能不太一樣。所以送檢的樣本一定要有代表性,送檢的樣本是有發(fā)病典型癥狀的豬2~3頭,這樣檢測的結(jié)果準(zhǔn)確度會高一些。 答:豬的淋巴結(jié)、脾臟、肺臟、腎臟都可以送檢進(jìn)行檢測。另外目前有些新的技術(shù)也可以使比如唾液用于藍(lán)耳病的檢測。 |